月季组织培养快速繁殖技术简介~

本帖最后由 floweroflife 于 2012-10-27 10:54 编辑

看到几位花友提到组培月季，好奇心起，找了几篇文章看了一下，挺有意思的，摘抄一点分享

当然，组培主要是用于工厂化的大规模生产，还有实验室里对月季生长、育种的研究，对于我们这些居家花友来说，很不实用。不过了解一下也蛮有趣的，呵呵~而且我觉得有些地方扦插时也可以借鉴~

比较乱，大家凑合一看吧，呵呵~

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【月季生长繁殖速度较慢, 应用组织培养技术可大大缩短它的增殖周期, 快速繁殖优良品种。在短期内繁殖出数以万计的苗木，这些苗木的遗传特性和表型特性与母株完全相同, 完全保持了母株的优良特性。月季花组培繁殖可以周年生产, 不受季节限制,并且耐贮藏不易烂苗, 可脱离培养基长途运输, 实现了苗木运输“微型化”。

配图不是月季哈~只是展示一下原理什么的~ :)

通过腋芽萌发途径建立月季组培体系

• 外植体选择

月季的腋芽萌发受多种因子的影响，主要与供试材料的基因型有关，同时还与外植体的取材部位有关。将切花月季的枝条均匀地分成7 段（含腋芽）进行培养，结果发现顶部和基部的芽萌发生长较慢，需11 ~13天, 而中部的芽萌发较快，仅需5天。从芽萌发到芽长到1cm左右需要2～3周。

• 消毒

从盆载的植株上, 选取健壮的当年生枝条, 用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。枝条去叶, 剥去附在茎上的叶柄及皮刺, 然后切成小段, 每段长2～3cm。每段至少带有一个侧芽, 把它们用水洗净, 用滤纸吸干。在无菌条件下用75%的酒精消毒30s, 再用0. 20%的升汞消毒10min, 最后用无菌水冲洗5～7遍, 在超净工作台上把它们接种于不同的芽分化培养基上。

• 培养基

以MS为基本培养基, 蔗糖3%～5%, 琼脂0. 90%, 附加不同的激素。诱导芽分化后, 进行继代培养, 使其不断的增殖, 增殖量达到一定程度后, 把“丛生”芽切下转入到另一种培养基中，让小芽生长。待苗高3～4cm时切下小苗, 再转移到生根培养基上。

• 外植体处理

国外有研究对诱导24h的离体芽尖实行冷藏处理，发现其能有效提高芽的再生率。褐化的防止:月季接种后切口表面会释放出多酚，由于多酚的氧化使外植体极易褐化而自毒死亡。可以在培养基中加入一些抗氧化的物质如PVP、柠檬酸、抗坏血酸等来防止褐化;另一种方法是外植体接种后将其置于黑暗条件下1一2天，然后再转入光照下培养可有效防止褐化，因为酚类物质的氧化需要光的诱导。

• 接种方式

将外植体垂直接种、斜向上45度接种及水平接种对微型月季腋芽再生芽生长量的影响不大，但水平接种更有利于腋芽诱导。反转接种的腋芽再生芽生长量明显低于前三种接种方式，只为水平接种的50%左右。

• 生根

无根试管苗的生根分为试管瓶内生根与瓶外生根两种。瓶内生根主要是调节培养基的成分和激素种类、浓度，诱导生根，瓶外生根和扦插一样。有研究发现瓶外所生的根较长、数量较多、横截面积较大，其中维管束所占的比重较大，且维管束发育早，根的韧性好、白色、有侧根;而瓶内所生的根较细、易碎、黑色、没有侧根。

• 苗的驯化与移栽

将瓶内生根小苗移入温室进行驯化，逐步过度到自然条件。有研究认为在疏松基质中，保持湿度75%以上，温度15~25℃，遮阳50%左右，驯化50天后即可移入大田。

以腋芽为外植体得微型月季微繁体系如下:

除腋芽外还可以通过器官（即以月季离体叶、根和愈伤组织为外植体诱导不定芽）和体细胞胚胎进行组培。】

参考文献：

月季育种及组培研究进展，张雨等，中国农学通报，2010

月季组培快繁技术的研究，李海燕等，东北农业大学学报，2004

微型月季微繁体系的构建及组培生根机理研究，牟会斌，南京农业大学，硕士论文，2001